Этап 9 / 15

Гликолиз — расщепление глюкозы в цитоплазме

10 ферментативных реакций превращают одну молекулу глюкозы в две молекулы пирувата. Происходит в цитоплазме каждого нейрона и астроцита, не требует кислорода.

Что происходит на самом деле

«Ловушка» для глюкозы. Как только глюкоза попадает в клетку через GLUT1/3, на неё прыгает гексокиназа и вешает фосфат, отнимая его от ATP. Получается глюкозо-6-фосфат — заряженная молекула, которая больше не пройдёт обратно через мембрану. Клетка как бы говорит: «теперь это моё». Гексокиназа в нейронах работает почти на максимуме всё время — мозгу постоянно нужно топливо.
Изомеризация — подготовка к разрезу. Г-6-Ф изомеризуется в фруктозо-6-Ф. Это нужно, потому что глюкоза несёт альдегидную группу на С1, а для будущего «разрезания пополам» нужна симметричная кетоформа.
Второе фосфорилирование — главная точка контроля. Фосфофруктокиназа-1 (PFK-1) добавляет ещё один фосфат к Ф-6-Ф, тратя второй ATP. Это самая регулируемая реакция гликолиза. PFK-1 ингибируется ATP (зачем нам ещё энергия?) и цитратом (цикл Кребса забит) и активируется AMP и фруктозо-2,6-биФ (энергии мало!). Здесь клетка решает, продолжать ли гликолиз.
Фермент-гильотина. Альдолаза разрезает фруктозо-1,6-бисфосфат пополам — получаются две триозы: дигидроксиацетонфосфат (ДГАФ) и глицеральдегид-3-фосфат (ГА-3-Ф). Только ГА-3-Ф пойдёт дальше, поэтому ДГАФ моментально изомеризуется триозофосфат-изомеразой в ГА-3-Ф. Теперь у нас 2 одинаковые молекулы, и каждая из них пройдёт по второй половине пути.
Извлечение электронов — рождение NADH. Глицеральдегид-3-Ф-дегидрогеназа (GAPDH) — узловой фермент. Она отбирает у ГА-3-Ф 2 электрона + протон и передаёт их на NAD+ → получается NADH. Это «энергетический ваучер»: NADH потом обменяет свои электроны на ~2.5 ATP в митохондрии. Параллельно реакция захватывает свободный фосфат прямо из цитозоля и встраивает его в субстрат.
Первое субстратное фосфорилирование. 1,3-бисфосфоглицерат — высокоэнергетическое соединение. Фосфоглицераткиназа отрывает у него фосфат и пришивает к ADP → получается ATP напрямую, без всяких митохондрий. Это «ATP бедняка», но именно он спасает нейрон, когда не хватает кислорода.
Перестановка фосфата. Фосфоглицератмутаза переносит фосфат с C3 на C2 — мелкая, но необходимая косметика для следующего шага.
Создание сверхвысокоэнергетической связи. Енолаза вырывает молекулу воды, и в полученном фосфоенолпирувате (ФЕП) энергия фосфатной связи становится огромной — −62 кДж/моль (для сравнения, у ATP −30). Это самая «заряженная» фосфатная связь в нашей биохимии.
Второе субстратное фосфорилирование. Пируваткиназа срывает фосфат с ФЕП на ADP — рождается ещё один ATP. Остаётся пируват. На каждую исходную молекулу глюкозы реакция произошла дважды (по разу на каждую триозу).
Бухгалтерия. Потратили 2 ATP в начале, заработали 4 ATP в конце → чистая прибыль 2 ATP + 2 NADH. Это очень мало по сравнению с тем, что можно получить дальше в митохондрии (~28 ATP), но огромное преимущество: гликолиз быстрый, идёт в цитозоле и не требует кислорода.

Что делать с пируватом дальше — решает наличие кислорода. При его достатке пируват уходит в митохондрию (этап 11). При нехватке (например, при интенсивной нагрузке астроцита) он превращается в лактат, который пойдёт к нейрону по лактатному челноку.

Вход
  • Глюкоза (C6H12O6)
  • 2 ATP (на инвестиционной фазе)
  • 2 NAD+
  • 4 ADP, 2 Pi
Локализация
  • Цитозоль нейрона
  • Цитозоль астроцита
  • 10 последовательных ферментов
10 ферментов
  1. Гексокиназа (HK)
  2. Глюкозо-6-фосфат-изомераза
  3. Фосфофруктокиназа-1 (PFK-1) ★
  4. Альдолаза
  5. Триозофосфат-изомераза
  6. Глицеральдегид-3-Ф дегидрогеназа (GAPDH)
  7. Фосфоглицераткиназа
  8. Фосфоглицератмутаза
  9. Енолаза
  10. Пируваткиназа (PK) ★
Выход
  • 2 пирувата (CH3COCOO)
  • 2 NADH + 2 H+
  • 4 ATP (валово), 2 ATP нетто
  • 2 H2O

Суммарное уравнение гликолиза

Гликолиз — итоговая реакция C6H12O6 + 2 NAD+ + 2 ADP + 2 Pi 2 C3H4O3 + 2 NADH + 2 H+ + 2 ATP + 2 H2O

Пошаговая последовательность

ИНВЕСТИЦИОННАЯ ФАЗА (затрата 2 ATP): 1. Глюкоза + ATP ──HK──▶ Глюкозо-6-Ф + ADP 2. Глюкозо-6-Ф ──PGI──▶ Фруктозо-6-Ф 3. Фруктозо-6-Ф + ATP ──PFK-1──▶ Фруктозо-1,6-биФ + ADP ★ необратимо 4. Фр-1,6-биФ ──альдолаза──▶ ДГАФ + ГА-3-Ф 5. ДГАФ ──TPI──▶ ГА-3-Ф ФАЗА ВОЗВРАТА (на каждую из 2 молекул ГА-3-Ф): 6. ГА-3-Ф + NAD⁺ + Pᵢ ──GAPDH──▶ 1,3-биФ-глицерат + NADH + H⁺ 7. 1,3-биФ-глицерат + ADP ──PGK──▶ 3-Ф-глицерат + ATP 8. 3-Ф-глицерат ──PGM──▶ 2-Ф-глицерат 9. 2-Ф-глицерат ──енолаза──▶ ФЕП + H₂O 10. ФЕП + ADP ──PK──▶ Пируват + ATP ★ необратимо БАЛАНС: −2 ATP + 4 ATP = +2 ATP, +2 NADH, 2 пирувата
Регуляция: PFK-1 активируется AMP, фруктозо-2,6-биФ; ингибируется ATP, цитратом. Это «датчик энергии» клетки.